PURIFICAÇÃO DE ENZIMAS DE EXTRATOS VEGETAIS POR AFINIDADE IMAC

Resumo

Criogeis são obtidos de precursores polimerizados em condições de congelamento. Realizou-se ensaios de produção do criogel de policlariamida para serem utilizados em processos de afinidade com íons metálicos imobilizados (IMAC), utilizando Cu++ e Zu++ e analisar o efeito de nas características dos adsorventes como capacidade de inchamento (S), grau de expansão (ED), porosidade (φ) e frações de macro, micro e mesoporos para criogéis controle e funcionalizados. Realizou-se teste de adsorção com lisozima e BSA para posteriormente explorar a potencial purificação da matriz em biocompostos. Em relação aos ativados com Cu++ e Zu++, o criogel apresentou elevada capacidade de interagição com água e isso se refletiu na grande quantidade de água retida em relação à massa de polímero do criogel. Os valores de S estão dentro das faixas reportadas para criogeis de poliacrilamida em diversos trabalhos da literatura. A fração de macroporos foi dominante no tipo de poros observado nos criogeis. Já a porosidade total foi pouco afetada com a funcionalização, permanecendo próxima aos 90% da estrutura. Os criogeis funcionalizados com Cu++ e Zn++ apresentaram capacidade adsortiva para lisozima de 139,38 e 154,74 e para BSA 32,08 e 40,86 (mgproteína·gcriogel-1). A matriz cromatográfica apresenta grande potencial em processos com macromoléculas pois desempenha bem seu objetivo no processo de purificação e imobilização de células e de biomoléculas.

Agência de fomento: PIBIC/CNPq